Corpo Discente - Egressos
Danielle Furtado da Silva
| Título | CARACTERIZAÇÃO QUÍMICA E AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE IMUNOMODULADORA E ANTICANCERÍGENA DE FRAÇÕES POLISSACARÍDICAS PROVENIENTES DE DUAS ESPÉCIES DE Ganoderma | ||||||||||||||||||||||||
| Data da Defesa | 14/06/2024 | ||||||||||||||||||||||||
| Download | Em sigilo | ||||||||||||||||||||||||
Banca
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| Palavras-Chaves | cogumelos, bioatividade, imunomodulação, citotoxicidade, antineoplásica | ||||||||||||||||||||||||
| Resumo | Os polissacarídeos de Ganoderma destacam-se por sua atividade terapêutica, especialmente através de sua capacidade imunomoduladora. Esses compostos complexos têm a habilidade de regular o sistema imunológico, tanto estimulando quanto suprimindo respostas imunes conforme necessário, fortalecendo as defesas do organismo, a capacidade dessas moléculas em equilibrar a função imunológica oferece uma abordagem promissora para a saúde, contribuindo para a prevenção e o tratamento de uma variedade de condições médicas. Sendo assim, este estudo tem como objetivo cultivar duas espécies de Ganoderma por fermentação em meio líquido para obter frações polissacarídicas derivadas da biomassa micelial e avaliar seu potencial antineoplásico e imunomodulador em linhagens celulares leucêmicas e normais. Os intrapolissacarídeos de Ganoderma lingzhi e Ganoderma sp. foram obtidos a partir do cultivo em fermentação submersa, onde foi realizada uma triagem em diferentes meios para a seleção do melhor para o crescimento de biomassa micelial e rendimento de exopolissacarídeos (EPS). Após o cultivo, as frações polissacarídicas foram obtidas por extração (aquosa e alcalina), seguida de precipitação, ciclos de gelo/degelo e diálise, e assim, foram semi-purificadas (obtendo- se então a fração aquosa, "GLW" e alcalina, "GLK"/ aquosa “GRW” e alcalina “GRK” que correspondem a Ganoderma lingzhi e Ganoderma sp. respectivamente). As amostras foram submetidas a análises de composição monossacarídica neutra, FT-IR e ressonância magnética para sua caracterização química e estrutural. Após, foi realizada à análise de citotoxicidade utilizando linhagens de células cancerígenas HL-60 e K-562, células normais PBMC e VERO, pelo teste de viabilidade celular MTT. Em paralelo, as frações de Ganoderma lingzhi foram submetidas à análise por DLS para verificação do diâmetro médio e potencial zeta, bem como das propriedades reológicas das soluções de polissacarídeos. As frações também foram avaliadas quanto à atividade imunomoduladora em macrófagos e dosagem de citocinas em células mononucleares do sangue periférico (PBMC) estimuladas com LPS, utilizando o Kit BD Cytometric Bead Array (CBA) Human Th1/Th2/Th17. As frações polissacarídicas de ambas as linhagens de cogumelos exibiram características estruturais e químicas similares, notadamente uma composição rica em glucose, acompanhada de uma atividade imunomoduladora robusta. Além disso, essas frações demonstraram capacidade de induzir a produção de citocinas, como IL-6 e IL-8, que facilitam a migração de células imunes para locais de inflamação. Estes achados, combinados com a análise reológica das frações e a ausência de citotoxicidade em células PBMC`s, sugerem o potencial terapêutico desses polissacarídeos em uma variedade de doenças. Espera-se que os dados gerados por este estudo contribuam para o desenvolvimento científico, fornecendo informações sobre as atividades biológicas dos polissacarídeos, especialmente em linhagens de cogumelos ainda pouco estudadas. Essas informações podem servir de base para estudos prospectivos visando a geração de novas estratégias terapêuticas de baixo custo, seguras e eficazes. | ||||||||||||||||||||||||
| Abstract | Ganoderma polysaccharides stand out for their therapeutic activity, especially through their immunomodulatory capacity. These complex compounds have the ability to regulate the immune system, both stimulating and suppressing immune responses as needed, strengthening the body`s defenses, the ability of these molecules to balance immune function, offering a promising approach to health, contributing to prevention and treatment . of a variety of medical conditions. Thus, this study aims to cultivate two species of Ganoderma by fermentation in liquid medium to obtain polysaccharide fractions derived from mycelial biomass and evaluate their antineoplastic and immunomodulatory potential in leukemia and normal cell lines. The intrapolysaccharides from Ganoderma lingzhi and Ganoderma sp. were obtained from cultivation in submerged fermentation, where screening was carried out using different methods for the best selection for mycelial biomass growth and production of exopolysaccharides (EPS). After cultivation, the polysaccharide fractions obtained by extraction (aqueous and alkaline), followed by precipitation, gel/thaw cycles and dialysis were extracted, and in the same way, the semi-purified forams (obtained by aqueous fraction, "GLW" and alkaline, " GLK"/alkaline “GRW” and “GRK” water that correspond to Ganoderma lingzhi and Ganoderma sp. The samples were subjected to neutral monosaccharide composition analyses, FT-IR and magnetic resonance for their chemical and structural characterization. Then, it was A cytotoxicity analysis was carried out using HL-60 and K-562 cancer cell lines, PBMC and VERO standard cells and MTT cell viability tests. In parallel, the Ganoderma lingzhi fragments were subjected to DLS analysis to verify the average diameter and potential. zeta, as well as the rheological properties of polysaccharide solutions. The sentences are also validated for immunomodulatory activity in macrophages and cytokine measurement in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) stimulated with LPS, using the BD Cytometric Bead Array (CBA) Human kit. Th1/Th2/Th17. The polysaccharide fractions of both mushroom strains have similar structural and chemical characteristics, notably a composition rich in glucose, accompanied by robust immunomodulatory activity. Furthermore, these fractions demonstrate the ability to induce the production of cytokines, such as IL-6 and IL-8, which facilitate the migration of immune cells to sites of inflammation. These decays, combined with the rheological analysis of the fractions and the absence of cytotoxicity in PBMC cells, suggest the therapeutic potential of these polysaccharides in various treatments. It is expected that the data generated by this study will contribute to the scientific development, providing information on the biological activities of polysaccharides, especially in button strains that are still little studied. This information could serve as a basis for prospective studies aimed at generating new low-cost, safe and effective therapeutic strategies. | ||||||||||||||||||||||||
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