Corpo Discente - Egressos
Marta Rodrigues de Oliveira
| Título | DIVERSIDADE FÚNGICA CULTIVÁVEL DO HABITAT AQUÁTICO DE Anopheles darlingi ROOT, 1926 E SEU POTENCIAL LARVICIDA E ANTIPLASMODIAL | ||||||||||||||||||||||||
| Data da Defesa | 31/08/2021 | ||||||||||||||||||||||||
| Download | Visualizar a Tese(4.93MB) | ||||||||||||||||||||||||
Banca
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| Palavras-Chaves | Anopheles darlingi; Aedes aegypti; Controle biológico; Diversidade fúngica; Metabólito bioativos. | ||||||||||||||||||||||||
| Resumo | Os mosquitos Anopheles darlingi Root, 1926 e Aedes aegypti Linnaeus, 1762, são insetos de grande importância para a saúde pública, pois são vetores de diversos agentes etiológicos de doenças humanas, como malária, dengue, chikungunyan, febre amarela urbana e Zika. O controle destes vetores é a ferramenta mais eficiente para conter a transmissão destes patógenos. Alguns fungos e seus metabólitos são eficazes no controle de vetores de doenças tropicais, em diferentes estágios de desenvolvimento. A interação entre fungos e formas imaturas, em seus criadouros, é um fator relevante para se conhecer e estabelecer estratégias objetivando controlar a transmissão destas doenças. Desta forma, este trabalho teve como objetivo principal investigar a diversidade fúngica cultivável obtida de ambientes aquáticos de larvas de Anopheles darlingi e de seus metabólitos para uso no controle do Ae. aegypti, do Plasmodium falciparum e de Candida. Este trabalho foi dividido em cinco capítulos. No capítulo I abordamos o estudo da diversidade e a riqueza fúngica dos criadouros das larvas de An. darlingi. Foram isoladas 206 linhagens fúngicas agrupadas e classificados em 30 morfotipos. Os morfotipos identificados pertenciam a três filos, cinco classes, dez ordens, 25 famílias e 26 gêneros de fungos. No capítulo II foi realizada a identificação de espécies fúngicas isoladas de ambientes aquáticos na região Amazônia. Foram investigados 55 isolados fúngicos, e a partir das análises filogenéticas das sequencias obtidas pelo sequenciamento da região ITS 1 e 2, 28 fungos foram identificados até o nível de espécie, 21 como possíveis espécies novas, cinco foram identificados como sp., e um isolado foi identificado somente até o nível de família. O capítulo III apresenta o estudo de linhagens fúngicas dos metabólitos com atividade larvicida contra Ae. aegypti. Foram estudados 72 extratos brutos de 36 fungos, 15 extratos fúngicos do meio liquido de cultivo apresentaram atividade larvicida igual ou superior a 50% e, destes, oito conseguiram matar mais de 90% das larvas em até 72 h, demonstrando alto potencial larvicida. No capítulo IV está a seleção de 20 extratos em estudo bioguiado pela atividade antiplasmodial in vitro dos extratos bioativos, frações e substância de fungo Diaporter sp. – 1242. Este estudo, permitiu o isolamento e a identificação de uma classe e uma substância com alta atividade antiplasmodial contra à cepa multirresistente de P. falciparum K1 (CI50 de 0.0179 µg/mL). No capítulo V foi avaliada a atividade antimicrobiana e citotóxica de metabólitos extraídos de micélios dos fungos anteriormente isolados. Os extratos testados apresentaram potencial antimicrobiano, sendo cinco extratos ativos contra cepas de Candida e dos extratos ativos, dois foram potencialmente citotóxicos. Portanto, os resultados obtidos neste trabalho confirmam que os ambientes aquáticos de larvas de An. darlingi apresentam uma alta diversidade microbiana, sendo esse ambiente um bom candidato para a descoberta de novas espécies fúngicas. Os metabólitos dos fungos isolados apresentam atividades larvicidas frente ao Ae. aegypti atividade antiplasmodial frente ao P. falciparum e antifúngica contra cepas de Candida. | ||||||||||||||||||||||||
| Abstract | The mosquitoes Anopheles darlingi Root, 1926 and Aedes aegypti Linnaeus, 1762, are insects of great importance to public health because they are vectors of several etiological agents of human diseases, such as malaria, dengue, chikungunya, urban yellow fever, and Zika. The control of these vectors is the most efficient tool to contain the transmission of these pathogens. Some fungi and their metabolites are effective in controlling tropical disease vectors at different stages of development. The interaction between fungi and immature forms, in their breeding sites, is a relevant factor to know and establish strategies to control the transmission of these diseases. Thus, the main objective of this work was to investigate the cultivable fungal diversity obtained from aquatic environments of Anopheles darlingi larvae and its metabolites for use in the control of Ae. aegypti, Plasmodium falciparum and Candida. This work was divided into five chapters. In the chapter, I addressed the study of the diversity and fungal richness of the breeding sites of An. darlingi larvae. A total of 206 fungal strains were isolated and grouped and classified into 30 morphotypes. The identified morphotypes belonged to three phyla, five classes, ten orders, 25 families, and 26 genera of fungi. In chapter II the identification of fungal species isolated from aquatic environments in the Amazon region was carried out. A total of 55 fungal isolates were investigated, and from the phylogenetic analyses of the sequences obtained by sequencing the ITS 1 and 2 regions, 28 fungi were identified to the species level, 21 as possible new species, five were identified as sp., and one isolate was identified only to the family level. Chapter III presents the study of fungal strains of the metabolites with larvicidal activity against Ae. aegypti. A total of 72 crude extracts of 36 fungi were studied, 15 fungal extracts of the liquid culture medium showed larvicidal activity equal to or greater than 50% and, of these, eight were able to kill more than 90% of the larvae in up to 72 h, demonstrating high larvicidal potential. In chapter, IV is the selection of 20 extracts in a bioguided study for the in vitro antiplasmodial activity of bioactive extracts, fractions, and substances from the fungus Diaporter sp. - 1242. This study allowed the isolation and identification of one class and one substance with high antiplasmodial activity against the multidrug resistant strain of P. falciparum K1 (CI50 of 0.0179 µg/mL). In chapter V the antimicrobial and cytotoxic activity of metabolites extracted from mycelia of the previously isolated fungi was evaluated. The tested extracts showed antimicrobial potential, being five extracts active against Candida strains and of the active extracts, two were potentially cytotoxic. Therefore, the results obtained in this work confirm that the aquatic environments of An. darlingi larvae present a high microbial diversity, being this environment a good candidate for the discovery of new fungal species. The metabolites of the isolated fungi show larvicidal activity against Ae. aegypti, antiplasmodial activity against P. falciparum, and antifungal activity against Candida strains. | ||||||||||||||||||||||||
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