Título | DIVERSIDADE E PRODUÇÃO DE ANTIMICROBIANOS DOS FUNGOS DECOMPOSITORES DE MADEIRA SUBMERSA EM LAGOS DA REGIÃO DO BAIXO RIO TAPAJÓS – PARÁ |
Data da Defesa | 02/06/2020 |
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Banca
Examinador | Instituição | Aprovado | Tipo |
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Dra. Antonia Queiroz Lima de Souza | UFAM | Sim | Membro | Dra. Katia Santana Cruz | FMT | Sim | Membro | Dra. Silvia Katrine Rabelo da Silva | UFOPA | Sim | Membro | Dr. João Paulo Alves Silva | USP | Sim | Membro | Dr. João Vicente Braga de Souza | INPA | Sim | Presidente |
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Palavras-Chaves | Biodiversidade; Fungos de água doce; Amazônia; Substâncias bioativas |
Resumo | Os ecossistemas aquáticos são locais que abrigam diversidade de espécies com potencial
biotecnológico como os fungos decompositores de madeira submersa em água de rios da
região amazônica, as quais precisam ser desvendadas. O objetivo geral da presente tese
foi investigar a diversidade e produção de antimicrobianos de fungos decompositores de
madeira submersa em ambientes aquáticos em Santarém-Pará. A presente tese contêm 3
capítulos: O primeiro capítulo possui as informações quanto a composição e a diversidade
de fungos decompositores de madeira submersa em dois lagos do estado do Pará; O
segundo capítulo possui a informações sobre a avaliação da produção de antimicrobianos
por fungos decompositores de madeira submersa em lagos da Amazônia brasileira; O
terceiro capítulo possui avaliação da composição química do extrato de Fusarium C12
com atividade antimicrobiana. Quanto a metodologia realizada, no estudo da diversidade
(capítulo um), foram realizadas coletas de madeira em decomposição dos Lagos Juá e
Maicá (Santarém-Pará), foram identificados por exame direto da madeira e por cultura
seguida de sequenciamento genético os táxons dos fungos presentes nessas amostras. Para
o estudo de avaliação de produção de antimicrobianos pelos fungos cultiváveis (capítulo
dois), foram realizados bioprocessos e os filtrados das culturas foram submetidos a
fracionamento e bioensaios para avaliar a atividade antimicrobianas frente a E. coli e S.
aureus. Para investigar a composição química do extrato do isolado Fusarium solani
LM6281 (capítulo três) foram realizados procedimentos de fracionamento químico e
análises cromatográficas, espectrométricas. Quanto aos resultados obtidos observou-se
que: Capítulo I - Frente a amostragem realizada, foram identificados os táxons no lago
Juá (10 sexuais e 13 assexuais, táxon mais frequente Xylomyces giganteus) e do lago do
Maicá (17 sexuais e 9 assexuais, táxon mais frequente Thielavia sp.). No lago Juá e Maicá
os índices de diversidade foram respectivamente H `: 2.6514 e H`: 2.8174 e o índice de
Sørensen entre esses lagos foi de somente 0.3673.; Capítulo II - Os filtrados de cultura
dos isolados Fluviatispora C34, Morosphaeriaceae C18, Monodictys C15 e Fusarium
C12 apresentaram antibacteriana e especificamente o filtrado de cultura do isolado
Fusarium C12 destacou-se apresentando CIM de 50 µg/mL frente as cepas S. aureus; e
Capítulo III- Fusarium C12 foi identificado como Fusarium solani LM6281 e os ensaios
preliminares de CCD de extrato bruto de acetato de etila do cultivo de F. solani LM6281
sugeriram a presença de terpenos, quinonas, fenólicos e de flavonoides e os espectros de
RMN de 1H sugeriram a presença de metabólitos como flavonoides e chalconas. O
fracionamento da fração orgânica de acetato por cromatografia de coluna aberta
resultando em 112 frações que foram analisadas por CCD. A análise por CCD produziu
informação que permitiu selecionar 30 frações com componentes majoritários e que
puderam ser unidas em 4 frações com perfis cromatográficos semelhantes/similares. A
bioautografia demonstrou que todas as 4 frações obtidas apresentaram atividade
antibacteriana e permitiu a identificação do Rf das frações ativas frente a S. aureus. |
Abstract | Aquatic ecosystems harbor a large species diversity with biotechnological potential, such
as wood-decomposing fungi submerged in rivers in Amazon region, which need to be
discovered. The general objective of this work was to investigate the diversity and
production of antimicrobials from submerged wood decomposing fungi in aquatic
environments in Santarém-Pará. This thesis contains 3 chapters: The first chapter contains
information the composition and diversity of submerged wood decomposing fungi in two
lakes in the state of Pará; The second chapter contains information the evaluation of the
production of antimicrobials by decomposing fungi of submerged wood in lakes in the
Brazilian Amazon; The third chapter has an evaluation of the chemical composition of
the Fusarium C12 extract with antimicrobial activity. The methodology was carried out,
in the study of diversity (chapter one), collections of decomposing wood were made from
the Juá and Maicá Lakes (Santarém-Pará), and were identified by direct examination of
the wood and by culture followed by genetic sequencing of fungal taxa present in these
samples. The evaluation of antimicrobials production by cultivable fungi (chapter two),
bioprocesses were carried out and the filtrates of the cultures were subjected to
fractionation and bioassays to evaluate the antimicrobial activity against E. coli and S.
aureus. To investigate the chemical composition of Fusarium solani LM6281 isolate
(chapter three), chemical fractionation procedures and chromatographic, spectrometric
analyzes were performed. Regarding the results obtained, it was observed that: Chapter I
- In view of the sampling performed, the taxa were identified in Lake Juá (10 sexual and
13 asexual, most frequent taxon Xylomyces giganteus) and Lake Maicá (17 sexual and 9
asexual, taxon most frequent Thielavia sp.). In Lake Juá and Maicá, the diversity indexes
were H `: 2.6514 and H`: 2.8174, respectively, and the Sørensen index between these lakes
was only 0.3673 .; Chapter II - The culture filtrates of the Fluviatispora C34,
Morosphaeriaceae C18, Monodictys C15 and Fusarium C12 isolates presented
antibacterial and specifically the culture filtrate of the Fusarium C12 isolate stood out
with a 50 µg / mL MIC against the S. aureus strains; and Chapter III- Fusarium C12 was
identified as Fusarium solani LM6281 and the preliminary CCD assays of crude ethyl
acetate extract from the cultivation of F. solani LM6281 suggested the presence of
terpenes, quinones, phenolics and flavonoids and the NMR spectra of 1H suggested the
presence of metabolites such as flavonoids and chalcones. The fractionation of the organic
acetate fraction by open column chromatography resulting in 112 fractions that were
analyzed by CCD. The analysis by CCD produced information that allowed to select 30
fractions with major components and that could be joined in 4 fractions with
similar/similar chromatographic profiles. Bioautography demonstrated that all 4 fractions
obtained showed antibacterial activity and allowed the identification of the RF of the
active fractions against S. aureus. |