Corpo Discente - Egressos

Carla Janaina Rebouças Marques do Rosário
TítuloEFEITO ANTI – Ehrlichia canis DE Ageratum conyzoides L. E SUA ASSOCIAÇÃO COM DOXICICLINA EM CULTURA DE CÉLULAS DH82
Data da Defesa14/06/2019
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Banca

ExaminadorInstituiçãoAprovadoTipo
Dra. Ana Lúcia Abreu SilvaUniversidade Estadual do MaranhãoSimMembro
Dra. Denise Fernandes CoutinhoUniversidade Federal do MaranhãoSimMembro
Dra. Maria do Socorro de Sousa CartágenesUniversidade Federal do MaranhãoSimMembro
Dr. Antônio Carlos Romão BorgesUniversidade Federal do MaranhãoSimMembro
Dr. Ferdinan Almeida MeloUniversidade Estadual do MaranhãoSimPresidente
Dr. Odair dos Santos MonteiroUniversidade Federal do MaranhãoSimMembro
Palavras-Chavescães;erliquiose;siringaresinol;prococeno I;fitoterapia;associação
ResumoAtualmente, Ehrlichia canis é considerado o patógeno canino de maior importância da América Latina. É a doença transmitida por carrapatos de maior prevalência em cães em várias regiões do Brasil, e o Maranhão está entre os estados de maior incidência. Apesar de rotineira, a erliquiose ainda não possui um tratamento alternativo para os animais sensíveis às tetraciclinas. Dessa forma o objetivo desse trabalho foi analisar a atividade anti- Ehrlichia do extrato bruto, frações e óleo essencial de Ageratum conyzoides L. em células DH82 infectadas com Ehrlichia canis, avaliando a eficácia e segurança deste tratamento em relação ao tratamento convencional com doxiciclina. Foram utilizadas monocamadas de células DH82 infectadas com E. canis numa taxa de infecção a 70 %, a serem avaliados em 18 e 36 horas após os tratamentos incubadas em estufa a 37 ºC e 5 % de CO2. Onde o tratamento controle utilizado foi a doxiciclina 1 µg.mL-1, e como controle do cultivo bacteriano, poços tratados apenas com água destilada. Obtivemos CI50 definidas em 300 µg.mL-1, 100 µg.mL-1, 200 µg.mL-1, 200 µg.mL-1 e 200 µg.mL-1 para o extrato bruto, fração hexânica, fração diclorometânica, fração aquosa e óleo essencial, respectivamente. Nenhum dos tratamentos apresentaram citotoxicidade até a concentração máxima de 500 μg.mL-1. Tanto o extrato, frações e o óleo essencial apresentaram efeito sinérgico quando testado junto com a doxiciclina. Foi determinado também o índice de redução da concentração (CRI) da concentração da doxiciclina em 3,35; 4,32; 5,83; 3,91 e 4,89 vezes para associação com extrato bruto, fração hexânica, fração diclorometânica, fração aquosa e óleo essencial de Ageratum conyzoides L, respectivamente. A partir da identificação dos compostos do extrato bruto e frações, observou-se que as lignanas foram os principais compostos encontrados, dentre elas, o siringaresinol e seus derivados. E os compostos majoritários do óleo essencial identificados foram o precoceno I e o cariofileno. Os produtos da espécie estudada mostraram-se bastante eficaz no tratamento contra E. canis, além de reduzir significativamente a concentração do tratamento convencional com doxiciclina.
AbstractEhrlichia canis is considered currently the most important canine pathogen in Latin America. It is the disease transmitted by ticks of greater prevalence in dogs in several regions of Brazil, and Maranhão is among the most incident states. Although routine, ehrlichiosis does not yet have an alternative treatment for animals sensitive to tetracyclines. Therefore, the objective of this work was to analyze the anti-Ehrlichia activity of the crude extract, fractions and essential oil of Ageratum conyzoides L. in DH82 cells infected with Ehrlichia canis, evaluating the alterations of this treatment in relation to the conventional treatment with doxycycline. Monolayers of E. canis infected DH82 cells were used at a 70% infection rate, to be evaluated at 18 and 36 hours after the treatments incubated in an oven at 37 °C and 5% CO2. Where the control treatment used was 1 μg.mL-1 doxycycline, and as control of the bacterial culture, wells treated with distilled water alone. We obtained IC50 defined as 300 μg.mL-1, 100 μg.mL-1, 200 μg.mL1, 200 μg.mL-1 and 200 μg.mL-1 for the crude extract, hexane fraction, dichloromethane fraction, fraction aqueous and essential oil, respectively. None of the treatments showed cytotoxicity up to a maximum concentration of 500 μg.mL-1. Both the extract, fractions and the essential oil showed a synergistic effect when tested along with doxycycline. The concentration reduction index (CRI) of the doxycycline concentracion was also determined at 3.35; 4.32; 5.83; 3.91 and 4.89 times for association with crude extract, hexane fraction, dichloromethane fraction, aqueous fraction and essential oil of Ageratum conyzoides L, respectively. From the identification of the compounds of the crude extract and fractions, it was observed that the lignans were the main compounds found, among them, the syringaresinol and its derivatives. And the major compounds of the essential oil identified were precocene I and caryophyllene. The products of the species studied were very effective in the treatment of E. canis, in addition to significantly reducing the concentration of conventional doxycycline treatment.
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