Corpo Discente - Egressos
Sebastião Luiz Pires Vargas
| Título | ANÁLISE DA ATIVIDADE ANTIMICROBIANA DE FUNGOS ENDOFÍTICOS DE Croton lechleri Müll. Arg. PARA PRODUÇÃO DE MEDICAÇÃO INTRACANAL RADICULAR CONTRA Enterococcus faecalis | ||||||||||||||||||||||||
| Data da Defesa | 08/06/2018 | ||||||||||||||||||||||||
| Download | Em sigilo | ||||||||||||||||||||||||
Banca
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| Palavras-Chaves | sangue-de-dragão; Enterococcus faecalis; medicação intracanal. | ||||||||||||||||||||||||
| Resumo | O metabolismo secundário de fungos endofíticos de plantas medicinais tem se revelado como fonte de bioativos com atividade antimicrobiana, antitumoral, anti-inflamatória, antiparasitária, dentre outros. Esses metabolitos têm o potencial de suprir a necessidade da odontologia atual, que pesquisa novos materiais com a finalidade de debelar as infecções endodônticas, principalmente às recorrentes associadas ao Enterococcus faecalis, que é uma das bactérias mais associada ao retratamento endodôntico. Croton lechleri é uma planta muito utilizada por populações tradicionais amazônicas para vários agravos à saúde, várias pesquisas comprovam sua eficácia biológica: anti-inflamatória, cicatrizante, antitumoral. Entretanto, não há relatos na literatura de sua diversidade endofítica, nem tampouco de atividade antibacteriana. Ante a isso, esse estudo objetivou análisar da atividade antimicrobiana de fungos endofíticos de croton lechleri müll. arg. para produção de medicação intracanal radicular contra Enterococcus faecalis, para isso foi realizada uma revisão bibliográfica de C. lechleri, abordando seu uso medicinal, fitoqúímico e farmacológico. Em seguida foi realizada a análise da diversidade e atividade antibacteriana dos fungos endofíticos com isolamento dos endófitos de folhas e caule, inoculado em meio de cultivo Batata-Dextrose-Ágar e Sabouraud com e sem o extrato do tecido vegetal, incubados 18 e 28o C. Os fungos isolados foram agrupados em morfoespécies, de acordo com suas características macro morfológicos e realizada identificação microscópica. Para obtenção dos extratos microbianos, os fungos foram inoculados em meio Batata-Dextrose e os metabólitos extraídos com acetato de etila para avaliação da atividade antibacteriana pelo teste de difusão em ágar. Os quatro fungos com melhores resultados de antagonismo ao E. faecalis foram submetidos aos ensaios de atividade antibacteriana em 55 blocos de dentina humana, que foram contaminados e submetidos aos testes com os metabolitos puros e associados ao hidróxido de cálcio com água destilada. Os dados da leitura com espectrofotômetro e os resultados de cada extrato testado foram analisados estatisticamente pelo teste t de Student com nível de significância de 95% através de comparação com o teste controle. No total, 575 fungos (307 das folhas, 268 de caule) foram isolados de 160 fragmentos e agrupados em 284 morfotipos fúngicos, distribuídos em 13 gêneros e desconhecidos. As atividades antibacterianas dos extratos em acetato de etila de cada um dos 284 morfotipos fúngicos foram analisadas in vitro frente a bactérias Gram positivas e negativas, apresentando 55 (19,37%) apresentaram atividade antibacteriana. Para o teste de bioatividade em dentina humana os extratos fúngicos, Penicillium sp. 2.2698, Penicillium sp. 2.2710, Curvularia sp. 2.1152 e Aspergillus sp. 2.2875 inibiram o crescimento do E. faecallis com valores estatisticamente significante (p-<0,001), tanto em sua forma pura, quanto associado ao hidróxido de cálcio. Portanto fica concluído nesse estudo que C. lecheleri é uma espécie rica em diversidade endofítica com elevado potencial antibacteriano, no qual a torna promissora na área de biotecnologia para bioprospecção de novas drogas. | ||||||||||||||||||||||||
| Abstract | The secondary metabolism of endophytic fungi of medicinal plants has proved to be a source of bioactive products with antimicrobial, antitumor, anti-inflammatory, antiparasitic activity, among others. These metabolites have the potential of supplying the need of the current dentistry, which investigates new materials to treat endodontic infections, especially those associated with Enterococcus faecalis, which is one of the bacterias that are most associated with endodontic retreatment. Croton lechleri is a plant widely used by traditional Amazonian populations for various health problems, several studies have proved its biological effectiveness: anti-inflammatory, healing, antitumor. However, there are no reports in the literature of its endophytic diversity or antibacterial activity. Taking this into consideration, this study aimed to analyze the antimicrobial activity of endophytic fungi of croton lechleri müll. arg. for the production of intracanal root canal medication against Enterococcus faecalis, for this purpose a bibliographic review of C. lechleri was carried out, addressing its medicinal, phytochemical and pharmacological use. Then, the analysis of the diversity and antibacterial activity of the endophytic fungi with leaves and stem endophytes inoculation in Potato-Dextrose-Agar and Sabouraud culture medium with and without the vegetal tissue extract were incubated at 18º and 28º C. The isolated fungi were grouped into morphospecies, according to their macro morphological characteristics and performed microscopic identification. In order to obtain the microbial extracts, the fungi were inoculated in Potato- Dextrose medium and the metabolites extracted with ethyl acetate to evaluate the antibacterial activity by the diffusion test in agar. The four fungi with the best results of E. faecalis antagonism were submitted to the tests of antibacterial activity in 55 blocks of human dentin, which were contaminated and subjected to the tests with the pure metabolites and associated with calcium hydroxide with distilled water. The data from the spectrophotometer reading and the results of each extract tested were statistically analyzed by the Student t test with a significance level of 95% by comparison with the control test. In total, 575 fungi (307 of the leaves, 268 of the stem) were isolated from 160 fragments and grouped into 284 fungal morphotypes, distributed in 13 genera and unknown. The antibacterial activities of the ethyl acetate extracts of each of the 284 fungal morphotypes were analyzed in vitro against Gram positive and negative bacteria, presenting 55 (19.37%) presented antibacterial activity. For the bioactivity test in human dentin the fungal extracts, Penicillium sp. 2.2698, Penicillium sp. 2.2710, Curvularia sp. 2.1152 and Aspergillus sp. 2.2875 inhibited the growth of E. faecallis with values statistically significant (p- <0.001), both in its pure form and associated with calcium hydroxide. Therefore, it is concluded in this study that C. lecheleri is a species rich in endophytic diversity with high antibacterial potential, in which it makes it promising in the area of biotechnology for bioprospecting new drugs. | ||||||||||||||||||||||||
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