Corpo Discente - Egressos
Rachid Pinto Zacarias Filho
| Título | SELEÇÃO E PRODUÇÃO DE EXO E/OU POLISSACARÍDEOS DE ORIGEM MICROBIANA DA AMAZÔNIA PARA O USO EM ODONTOLOGIA | ||||||||||||||||||||||||
| Data da Defesa | 27/12/2018 | ||||||||||||||||||||||||
| Download | Em sigilo | ||||||||||||||||||||||||
Banca
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| Palavras-Chaves | Endófitos, Polissacarídeos fúngicos, MTA, Biomateriais, Odontologia. | ||||||||||||||||||||||||
| Resumo | Nos últimos anos, vem sendo dada importância aos metabólitos produzidos por microrganismos endofíticos, em razão de suas diferentes aplicações biotecnológicas e pela possibilidade da transferência vertical, ou seja, dos microrganismos endofiticos serem capazes de produzir as mesmas classes de substâncias de suas hospedeiras. Dentre os polissacarídeos microbianos, o interesse principal encontrase voltado aos extracelulares ou exopolissacarídeos, por serem biocompatíveis e muitos destes apresentarem atividade antibiótica. Com o objetivo de produzir um cimento experimental a partir de exo e/ou polissacarídeos de origem microbiana da Amazônia para o uso em Odontologia e avaliar a atividade antimicrobiana de seus extratos frente aos patógenos Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Enterococcus feacalis, Candida albicans e C. tropicalis (. Foram selecionadas e cultivadas 21 linhagens de fungos endofíticos e aquáticos, cujos aspectos morfológicos indicavam pertencerem aos gêneros Trichoderma, Colletotrichum, Aspergillus, Paecilomices, Xylaria, Phomopsis e Pestalotiopsis, em meio de cultura batata-dextrose (BD), acrescido de 0,2% de extrato de levedura, a 24±1° C por 21 a 28 dias de acordo com o desenvolvimento das colônias. O micélio foi separado por filtração a vácuo e os constituintes fixos extracelulares (meio de cultura fermentado) e intracelulares (micélio) foram extraídos com metanol (MeOH) sob refrigeração a 4o C. Os ensaios para determinação da atividade antimicrobiana foram realizados em placas de ELISA de 96 poços. Foram confeccionados 6 grupos: GC - cimento de agregado trióxido mineral (MTA) branco Angelus® e G2 a G6 - parte do pó de MTA foi substituído, em diferentes concentrações (5%,10%,15%, 20%, 25%), pela fração extraída do cultivo do fungo P. microspora. O gênero Pestalotiopsis mostrou-se mais efetivo nos testes antimicrobianos, especificamente o P. microspora, fungo endofítico obtido da planta Annona sp, da família Annonaceae, com a concentração inibitória mínima de 0,125 para E. feacalis, 0,25 para S. aureus, P. aeruginosa, C. albicans e 0,5 para C. tropicalis. Na avaliação da atividade antimicrobiana do cimento experimental, houve atividade para o S. aureus, E. coli, P. aeruginosa e E. feacalis nos grupos GC, G5 (MTA + 20%) e G6 (MTA + 25%). O G6 (MTA + 25%) apresentou maiores valores de todos os grupos e não houve diferenças siginificativas entre os grupos de E. coli, S. aureus e E. faecalis. Do extrato também foram realizadas análises químicas. A adição do extrato de polissacarideos intracelular do fungo endofítico P. microspora melhorou a atividade antimicrobiana do MTA e também foi produzida uma membrana experimental, constituindo-se alternativas promissoras para o uso odontológico. | ||||||||||||||||||||||||
| Abstract | In recent years, importance has been given to the metabolites produced by endophytic microorganisms, due to their different biotechnological applications and the possibility of vertical transference, that is, the endophytic microorganisms are able to produce the same classes of substances from their hosts. Among the microbial polysaccharides, the main interest is focused on extracellular or exopolysaccharides, because they are biocompatible and many of them present antibiotic activity. With the objective of producing an experimental cement from exo and / or polysaccharides of microbial origin of the Amazon for the use in Dentistry and to evaluate the antimicrobial activity of its extracts against the pathogens Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Enterococcus feacalis, Candida albicans and C. tropicalis were selected and cultivated 21 lines of endophytic and aquatic fungi, whose morphological aspects indicated that they belong to the gender Trichoderma, Colletotrichum, Aspergillus, Paecilomices, Xylaria, Phomopsis and Pestalotiopsis, in potato-dextrose (BD) , plus 0.2% yeast extract at 24 ± 1 ° C for 21 to 28 days according to colon development The mycelium was separated by vacuum filtration and fixed extracellular constituents (fermented culture medium) and intracellular (mycelium) were extracted with methanol (MeOH) under refrigeration at 4°C. Assays for activity determination were performed on 96- well ELISA plates. Six groups were prepared: GC - white mineral trioxide aggregate (MTA) Angelus ® and G2 to G6 - part of the MTA powder was replaced in different concentrations (5%, 10%, 15%, 20%, 25%), by the fraction extracted from the cultivation of the fungus P. microspora. The genus Pestalotiopsis was more effective in antimicrobial tests, specifically P. microspora, an endophytic fungus obtained from the Annona sp plant of the Annonaceae family, with a minimum inhibitory concentration of 0.125 for E. feacalis, 0.25 for S. aureus, P. aeruginosa, C. albicans and 0.5 for C. tropicalis. In the evaluation of the antimicrobial activity of the experimental cement, there was activity for S. aureus, E. coli, P. aeruginosa and E. feacalis in the GC, G5 (MTA + 20%) and G6 (MTA + 25%) groups. The G6 (MTA + 25%) presented higher values of all groups and there were no significant differences between the groups of E. coli, S. aureus and E. faecalis. Chemical analyzes were also carried out from the extract. The addition of the intracellular polysaccharide extract from the endophytic fungus P. microspora improved the antimicrobial activity of the MTA and also produced an experimental membrane, constituting promising alternatives for dental use. | ||||||||||||||||||||||||
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