Corpo Discente - Egressos
Marta Adelino da Silva Faria
| Título | Produção e caracterização de nanopartícula lipídica sólida com gordura de murumuru (Astrocaryum ulei Burret). | ||||||||||||||||||||||||
| Data da Defesa | 28/12/2016 | ||||||||||||||||||||||||
| Download | Em sigilo | ||||||||||||||||||||||||
Banca
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| Palavras-Chaves | Nanotecnologia;lipídios;Carreador de fármaco | ||||||||||||||||||||||||
| Resumo | Nanopartículas Lipídicas Sólidas (NLS) são sistemas coloidais alternativos para o controle da entrega de fármacos, quando comparados aos sistemas tradicionais por apresentarem vantagens, tais como, solubilização de princípios ativos lopossolúveis, liberação sustentada de ativos, estabilidade físico-química para fármacos termolábeis e redução de efeitos colaterais. Na produção de NLS são utilizadas ceras ou gorduras vegetais, animais ou sintéticas na composição da matriz lipídica. O objetivo deste estudo foi desenvolver um carreador lipídico nanoestruturado do tipo NLS utilizando gordura vegetal extraída da amêndoa do murumuru, uma palmeira da região Amazônica. Além disso, foi analisado o efeito da variação do Equilíbrio Hidrófilo Lipófilo (EHL) sobre as características físico-químicas das NLS obtidas. A metodologia utilizada no preparo das NLS foi o de homogeneização de alta energia e a técnica do Diagrama Ternário de Fases (DTF) com EHL variando nas faixas de 8, 10, 12 e 14. Para avaliação da atividade antifúngica foram realizados testes de atividade inibitória in vitro em leveduras, utilizando cepas de Candida albicans ATCC 90028, Candida tropicalis ATCC 13803, Candida parapsilosis ATCC 22019 e Candida glabrata ATCC 2001. Os ensaios de citotoxicidade foram realizados em cultura de fibroblastos NIH-3T3 tratadas com NLS branco (NLS-branco) e com NLS carregadas com cetoconazol (NLS-ceto) nas concentrações de 1; 10; 100 e 1000 µg.mL-1. Os resultados do espectrograma de Cromatografia gasosa com detector de massa acoplado (GC-MS) da gordura de murumuru demonstraram rica composição de ácidos graxos, sendo o ácido láurico o componente majoritário com 68,19% dos ácidos graxos totais, o espectro de infravermelho apresentou as bandas características de ácidos graxos como o estiramento C-CO-C em 1175 cm-1. O ponto de fusão do murumuru de 35 ºC foi confirmado por Calorimetria Diferencial de Varredura (DSC) e as medidas de espectroscopia de Raman confirmaram as insaturações presentes nos ácidos graxos típicos de gorduras. Os ensaios Microbiológicos da gordura de murumuru destinaram-se a verificar a não presença de microrganismos patogênicos. Para a formação das NLS a técnica do DTF evidenciou as concentrações ideais de gordura de murumuru/tensoativos/água nas proporções de 5,0/2,2/92,8 respectivamente. Na análise do EHL sobre a formação de NLS, foi observada forte influência do EHL = 12 nas 40 formulações testadas, quando comparados aos demais EHL. A NLS obtida teve taxa de encapsulação de 69,5% e significativa atividade antimicrobiana contra as cepas de Candida testadas. Os resultados de citotoxicidade demonstraram significante efeito proliferativo das NLS-ceto e NLS-branco nas concentrações de 1; 10 e 100 (p ≤ 0,0001) com 48 h de exposição do tratamento e efeito citotóxico na concentração de 1000 μg/mL (p ≤ 0,0001). Em conclusão, o EHL = 12 foi o que apresentou maior influência sobre as características físico-químicas das NLS testadas. A gordura de murumuru apresentou boas características para compor a matriz lipídica de carreador de fármaco do tipo NLS, apresentando taxa de encapsulação em conformidade com o descrito na literatura científica, efeito proliferativo em células epidérmicas e baixa citoxicidade, sugerindo ser uma boa opção para incorporar princípio-ativo para tratar doenças da pele. | ||||||||||||||||||||||||
| Abstract | Solid lipid nanoparticles (SLN) are colloidal systems for controlling of drug delivery properties, when compared to traditional systems because they present advantages such as solubilization of lipophilic molecules, drug sustained release pattern, physical-chemical stability for thermolabile drugs and reduction of side effects. It is used for the SLN manufacturing waxes or fats from vegetable, animal or synthetic for compose the matrix. The aim of this study was to develop a nanostructured lipid carrier of the SLN using vegetable fat extracted from the almond of murumuru, a palm tree from the Amazon region. In addition, the effect of Lipophilic Hydrophilic Equilibrium (LHE) variation on the physicochemical characteristics of the SLN obtained was analyzed. The methodology used in the preparation of SLN was the high energy homogenization and the Ternary Phase Diagram (TPD) technique at different LHE (8, 10, 12 and 14). For the evaluation of the antifungal activity, tests of inhibitory activity “In vitro” using Candida albicans ATCC 90028 strains, Candida tropicalis ATCC 13803, Candida parapsilosis ATCC 22019 and Candida glabrata ATCC 2001. Cytotoxicity assays were performed on culture of NIH-3T3 fibroblasts treated with white SLN (SLN-white) and with NLS loaded with ketoconazole (SLN-keto) at concentrations of 1; 10; 100 and 1000 μg.mL-1. The results of the GC spectroscopy-tandem mass spectometry (GC-MS) of murumuru fat showed rich fatty acids content, wich lauric acid being the major content with 68.19% of total fatty acids. The infrared spectrum showed characteristic bands of fatty acids like the C-CO-C stretch in 1175 cm-1. The murumuru melting point of 35 °C was confirmed by Differential Scanning Calorimetry (DSC) and the Raman spectroscopy measurements confirmed the typical fats unsaturations. Microbiological tests of murumuru fat were used to verify the presence of pathogenic microorganisms. For the formation of SLN, the TPD technique showed ideal concentrations of murumuru fat/surfactants/water in the proportions of 5.0 / 2.2 / 92.8 respectively. In the analysis of LHE on the formation of SLN, a strong influence of LHE = 12 was observed in the 40 formulations tested, when compared to the other LHE. The obtained NLS had a 69.5% encapsulation rate and significant antimicrobial activity against Candida sp strains tested. The results of cytotoxicity demonstrated a significant proliferative effect of SLN-keto and SLN-white at concentrations of 1; 10 and 100 (p ≤ 0.0001) with 48 H of treatment exposure and cytotoxic effect at the concentration of 1000 μg.mL-1 (p ≤ 0.0001). In conclusion, the LHE = 12 was the one that had the greatest influence on the physical-chemical characteristics of the SLN tested. The fat of murumuru presented good characteristics to compose the lipid matrix of SLN drug carrier type, presenting encapsulation rate as described in the literature, proliferative effect in epidermal cells and low cytoxicity, suggesting being a good option to incorporate drugs to treat skin diseases. | ||||||||||||||||||||||||
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