Título | Bioprospecção de estirpes de Bacillus thuringiensis com atividade para lepidópteros-praga. |
Data da Defesa | 18/08/2017 |
Download | Em sigilo |
Banca
Examinador | Instituição | Aprovado | Tipo |
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Dra. Talita Pereira de Souza - Membro da Banca Examinadora | Universidade Federal de Tocantins | Sim | | Dr. Julcemar Didonet - Membro da Banca Examinadora | Universidade Federal de Tocantins | Sim | | Dr. Manoel Mota dos Santos - Membro da Banca Examinadora | Universidade Federal de Tocantins | Sim | | Dr. Raimundo Wagner de Souza Aguiar - Presidente da Banca Examinadora | Universidade Federal de Tocantins | Sim | | Dr. Rodrigo Ribeiro Fidelis - Membro da Banca Examinadora | Universidade Federal de Tocantins | Sim | |
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Palavras-Chaves | Proteína Cry;Lepidópteros;Entomopatógeno;Inseticida microbiano;Controle de insetos |
Resumo | No Brasil, Spodoptera frugiperda (J. E. Smith, 1797) (Lepidoptera: Noctuidae) é a principal praga do milho por causar sérios danos que podem reduzir a produção. O controle biológico desta praga tem como alternativa viável a utilização de bioinseticidas formulados à base de B. thuringiensis. A seleção de novas estirpes eficazes contra a S. frugiperda é uma alternativa viável por serem biodegradáveis, seguro a saúde humana e maioria dos organismos benéficos. Outra alternativa importante é a caracterização molecular destes isolados baseada no perfil de genes cry, que permite determinar e verificar a distribuição de genes cry, detectar e identificar novos genes cry com atividade tóxica, e por fim produzir bioinseticidas com diferentes especificidades. Neste sentido, objetivou-se selecionar e caracterizar estirpes de Bacillus thuringiensis com atividade tóxica para Spodoptera frugiperda. A partir de 3.384 colônias foram selecionados cinquenta e dois isolados formadores de cristal B. thuringiensis. Avaliou-se a toxidade para S. frugiperda e verificou-se a presença de genes cry (cry1, cry1Aa, cry1Ab, cry1Ac, cry1D, cry2 e cry2Ab) para os isolados testados. Os cristais foram analisados por microscopia eletrônica e mostrou formas bipiramidais e cúbicas. Dentre os isolados testados, SUFT01, SUFT02, SUFT03 e SUFT04 obteve alta toxicidade contra S. frugiperda, presença do gene cry2 e concentração letal (CL50) de 44,5, 74,0, 89,0 e 108 ng/cm2 para larvas neonatas de S. frugiperda, respectivamente. Uma análise ultra-estrutural das células do intestino médio de S. frugiperda incubadas com complexo esporo-cristal do isolado SUFT01 mostrou rupturas na integridade celular e na microvilosidades das células cilíndricas do intestino médio. Neste estudo, o alto nível de atividade inseticida de isolados os torna excelentes candidatos para o controle de S. frugiperda, e pode proporcionar alternativas no controle destas populações de pragas, bem como a formação de novos bioinsecticidas. |
Abstract | In Brazil, Spodoptera frugiperda (JE Smith, 1797) (Lepidoptera: Noctuidae) is the main pest of corn to cause serious damage that can reduce production. The biological control of this pest is a viable alternative to the use of biopesticides made on the basis of B. thuringiensis. The selection of new strains effective against S. frugiperda is a viable alternative because they are biodegradable, safe to human health and most beneficial organisms. Another important alternative is the molecular characterization of isolates cry genes based on the profile, which allows to determine and check the distribution of cry genes detection and identification of new cry genes with toxic activity and ultimately produce biopesticides with different specificities. In this sense, it aimed to select and characterize strains of Bacillus thuringiensis with toxic activity for Spodoptera frugiperda. From 3384 colonies were selected fifty-two isolated crystal trainers B. thuringiensis. It was evaluated the toxicity towards S. frugiperda and verified the presence of cry genes (cry1, cry1Aa, cry1Ab, cry1Ac, Cry1D, Cry2 and cry2Ab) for the tested isolates. The crystals were analyzed by electron microscopy and showed bipiramidal and cubic forms. Among the isolates tested, SUFT01, SUFT02, SUFT03 and SUFT04 got high toxicity against S. frugiperda, gene presence cry2 and lethal concentration (LC50) of 44.5, 74.0, 89.0 and 108 ng/cm2 for neonate larvae S. frugiperda, respectively. An ultrastructural analysis of the midgut of S. frugiperda cells incubated with sporecrystal complex isolated SUFT01 showed disruptions in cellular integrity and microvilli of the midgut cells cylindrical. In this study, the high level of insecticidal activity of isolated makes them excellent candidates for the control of S. frugiperda, and can provide alternatives to control these pest populations, as well as the formation of new bioinsecticides |