Corpo Discente - Egressos
Paulo Eduardo Santos Avila
| Título | Processos inflamatórios, novas perspectivas: estudos e adaptação de modelo experimental e droga. | ||||||||||||||||||||||||
| Data da Defesa | 27/06/2016 | ||||||||||||||||||||||||
| Download | Em sigilo | ||||||||||||||||||||||||
Banca
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| Palavras-Chaves | inflamação;ágar;analgesia;anti-inflamatórios não esteróides | ||||||||||||||||||||||||
| Resumo | Inflamação é uma tentativa do organismo de remover estímulos nocivos e iniciar, assim, uma cascata de respostas com intuito de promover a cura. Existe uma variedade de mecanismos inflamatórios envolvidos em infecções, doenças crônicas e outras lesões teciduais. O entendimento desses mecanismos e a busca de novos medicamentos anti-inflamatórios com maior especificidade e menos efeitos colaterais fundamentam o desenvolvimento e aperfeiçoamento de novos protocolos e a padronização de modelos inflamatórios experimentais para compreender melhor essas questões. O objetivo do presente estudo foi avaliar o ágar como agente flogístico em modelo experimental de bolsa de ar em ratos Wistar e a atividade anti-inflamatória e analgésica do ácido 3-benzoil-propiônico (A3BP) e seu potencial efeito toxicológico. Utilizamos o modelo de bolsa de ar, nas doses 1%, 2%, 3% e 4% de ágar e comparamos com 1% de carragenina, um modelo previamente estabelecido. Foi possível determinar a dose mais efetiva de ágar e buscar seu mecanismo de ação. Para isso, foram utilizados fármacos anti-inflamatórios convencionais Celecoxib (200 mg/kg) ou ácido acetilsalicílico (ASA; 100mg/kg) uma hora antes da injeção de ágar. Para obtenção dos resultados, foram feitas análises morfométricas da bolsa de ar, medida da atividade nitrérgica e dos níveis de PGE2, migração celular e contagem diferencial de células leucocitárias no exsudado inflamatório. O ágar 2% foi capaz de promover aumento da microvasculatura na bolsa de ar, dos níveis de NO e PGE2 e do processo de migração celular. A contagem diferenciada de células leucocitárias mostrou prevalência de neutrófilos. Celecoxib e ASA inibiram os efeitos inflamatórios do ágar, reduzindo a área da microvasculatura no tecido, assim como os níveis de nitrito e PGE2 e o número de células inflamatórias no exsudado. Para testar o A3BP como nova droga anti-inflamatória e analgésica, usamos o modelo de bolsa de ar com carragenina 1% em modelo in vitro de cultura de células para testar a genocitotoxicidade. No modelo in vitro, o A3BP apresentou baixo grau de risco genotóxico e baixa citotoxicidade, mostrado pelo ensaio do cometa, e nenhum dano à membrana plasmática pelo teste hemolítico em eritrócitos. No estudo da atividade anti-inflamatória in vivo pelo método de bolsa de ar, foram realizados ensaios de dosagem de nitrito, níveis de PGE2 e migração celular. Para verificar efeitos analgésicos da droga A3BP, foram feitos testes in vivo de contorções abdominais induzidas pelo ácido acético e formalina. Quanto à atividade anti-inflamatória, o A3BP apresentou intensa atividade, demonstrada na redução acentuada da migração celular e níveis de NO, com grande população de neutrófilos e redução dos valores de PGE2 na dose de 0,5mg/kg. Nos estudos da atividade antinociceptiva, o A3BP reduziu o número de contorções abdominais e o tempo de lambida nas fases neurogênica e inflamatória do teste de formalina. Os resultados obtidos com o ágar como agente flogístico em modelo experimental de bolsa de ar demonstraram que o protocolo descrito neste trabalho fornece uma alternativa para estudos que envolvam a inflamação, sendo útil no screening de novas drogas anti-inflamatórias como uma alternativa simples e barata. O presente estudo também avançou substancialmente em relação às propriedades anti-inflamatórias e analgésicas do A3BP, ao fornecer evidências do seu provável mecanismo de ação, por meio da avaliação da atividade antinociceptiva, assim como da atividade anti-inflamatória in vitro e in vivo, em que o A3BP não mostrou efeito genotóxico. | ||||||||||||||||||||||||
| Abstract | Inflammation is an attempt by the body to remove noxious stimuli and initiate thus a cascade of responses in order to promote healing. There are a variety of inflammatory mechanisms involved in infections, chronic diseases and other tissue damage. Understanding these mechanisms and the search for new anti-inflammatory drugs with greater specificity and fewer side effects, underlying the development and improvement of new protocols and standardization of experimental inflammatory models to understand better these issues.The aim of this study was to evaluate the agar as phlogist on agent in experimental air pouch model in Wistar rats, and evaluate the anti-inflammatory and analgesic activity of 3-benzoyl-propionic acid (A3BP) and its potential toxicological effect. We use the air pouch model at doses 1%, 2%, 3% and 4% of agar, and compared with 1% carrageenan, a previously established model. It was possible to establish the most effective dose of agar and seek its mechanism of action. For this, they were used conventional anti-inflammatory drug Celecoxib (200mg/kg) or Acetylsalicylic acid (ASA; 100mg/kg) 1 hour before injection of the agar. To obtain the results, morphometric analysis of the air pouch were made, measure of the nitrergic activity and PGE2 levels, cell migration and differential leukocytes cells in the inflammatory exudate.The 2% agar was able to promote increase of the microvasculature in the air pouch, the levels of NO and PGE2, and the cell migration process. The differentiated cells leukocyte count showed a prevalence of neutrophils. Any Celecoxib or ASA inhibit the inflammatory effects of agar, reducing the area of microvasculature in the tissue as well as the nitrite and PGE2 levels and the number of inflammatory cells in the exudate. To test the A3BP as new anti-inflammatory and analgesic drug, the use carrageenan air pouch model 1% by in vitro model of cell culture to test genocytotoxicity. In the in vitro model the A3BP presented low level of genotoxic and low cytotoxicity risk, shown by comet assay and no damage to the plasma membrane by hemolytic test erythrocytes. In the study of anti-inflammatory activity in vivo by the air pouch method were conducted nitrite dose trials, PGE2 levels and cell migration. To verify analgesic effects of A3BP drug in vivo tests of abdominal contortions induced by acetic acid and formalin were performed. Regard to the anti-inflammatory activity, A3BP showed intense activity shown in marked reduction of cell migration and levels of NO, with large populations of neutrophils and reduction of PGE2 values at a dose of 0.5mg/kg. In studies of antinociceptive activity, A3BP reduced the number of writhes and the time lick the neurogenic and inflammatory phases of the formalin test.The results of the agar as phlogistic agent in an air pouch experimental model shown that the protocol described in this paper provides an alternative for studies involving inflammation and is useful in screening of new anti-inflammatory drugs such as simple and cheap alternative. This study also advanced substantially with respect to anti- inflammatory and analgesic properties of A3BP by providing evidence of their likely mechanism of action, through the evaluation of antinociceptive activity, as well as the anti-inflammatory activity in vitro and in vivo, where the A3BP showed no genotoxic effect. | ||||||||||||||||||||||||
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